Not again.ってどんな使い方？

“Oh no, not again.“

またかよ、いい加減勘弁してよ

“Not again.”という表現を直訳すると、「またではない」という意味になりますが、ここではそういう意味ではなく、「まただよ（嫌になるな）」、「またかよ」、「いい加減勘弁してよ」または「こんなことがまた起こるなんて信じられない」などという意味になりますが、「もうこれ以上同じようなことをさせないでほしい」とか「もうこれ以上同じようなことをしないてほしい」という意味合いで用いられます。

何度も同じような嫌なこと・不愉快なことが起こって、うんざりしている場合に用いられる表現ですね。

“Oh no, not again.”「え～、またかよ～」という感じで、溜息まじりに用いられることが多いです。

“What time do you get off work today?”
「今日は仕事何時ごろ終わるの？」
“Well, I don’t know. It could be late.”
「う～ん、わからないな。遅くなるかも。」
“Oh no, not again.”
「え～、またなの？」